这些关于HIV感染实验室检测的迷思,你需要知道

基因检测
阅读:7 作者:佳疗健康网 2021-03-05 15:51:17

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随着科学技术的发展,艾滋病毒的检测变得非常方便,但这并不意味着艾滋病毒感染的诊断如此简单和随意。

为了确定一个人是否感染了艾滋病毒,我们在实验室中至少有五种方法:


1)通过电子显微镜直接观察纳米级病毒颗粒;


2)用淋巴细胞悬液培养和鉴定HIV;


3)检测到病毒抗原;


4)检测人体对艾滋病毒的特异性免疫反应,例如抗体;


5)检测并成功扩增HIV的遗传物质,即核酸。


前两种方法的技术要求和成本太高,无法普及为常规检查方法。因此,目前对HIV感染的临床诊断主要是通过血清学方法,即检测体内是否存在HIV特异性抗原和抗体以及HIV核酸。该检测主要用于监测抗病毒治疗的效果和评估耐药性。


尽管快速检测条也可以用于特异性检测HIV抗原和抗体,但是只要有两个“标准”,我们就可以说这个人患有艾滋病。通过血清学检查诊断HIV非常谨慎,包括筛查和补充(确认)检测。筛选试验主要对样品中的HIV-1 / 2特异性抗体和HIV-1 p24抗原进行免疫分析。排除窗口后,筛选测试结果为阴性,无需进一步测试。如果初始筛选为阳性,则需要使用原始试剂和另一种试剂重复测试。如果两者均为阴性,则报告HIV抗体为阴性。如果一种或两种试剂呈阳性,则需要进行其他测试以检测HIV特异性抗体条带。如果未产生条带,则报告的HIV-1 / 2抗体为阴性。如果有条带但不满足诊断条件,则报告不确定,可以进行进一步的核酸检测或随访。如果一个带满足阳性诊断,则诊断为HIV感染,并出具HIV-1 / 2抗体阳性的确认报告。


这表明实验室对艾滋病毒感染的诊断是非常认真和谨慎的。为了重申对HIV感染进行实验室诊断的重要性,国内著名的AIDS专家,上海公共卫生临床中心的陆宏洲教授,康奈尔大学斯隆-凯特琳纪念医院(Cloone-Kettering Cancer Hospital)是美国微生物学会的院士(斯隆-凯特琳纪念癌症中心)唐一玮教授在国际知名期刊《新兴微生物与感染》(EMI,2018影响因子6.212)上合着了一篇文章,从专业和严格的角度来看,实验室诊断HIV感染的几个主要神话近几年来解释。


误解1:核酸扩增(NAA)阳性可诊断HIV感染


可以通过PCR或其他体外酶介导的核酸扩增技术对感染者中的HIV-1核酸进行定性或定量检测。这对于评估HIV感染状况,了解HIV在体内的复制以及进行耐药性检测非常重要。但是,NAA测试无法取代血清学测试,而成为诊断HIV感染的金标准。结合P24抗原和HIV-1 / 2抗体的四代免疫分析可以快速,灵敏地提供可靠的测试结果。仅在某些特殊情况下,当我们无法通过检测患者体内与HIV相关的抗原和抗体来确认诊断时,需要进行NAA检测以帮助诊断。例如,感染了艾滋病毒的母亲所生的新生儿可能会从母亲那里携带艾滋病毒抗体,而血清学检测可能会给出假阳性结果。这时,核酸测试可以帮助您及早确定孩子的感染状况。


将NAA测试错误地用于诊断HIV感染很容易导致误诊,尤其是在使用慢病毒载体进行基因治疗的人群中,NAA测试可能会成为假阳性。 Laetsch等。报道说,四名接受基因药物替沙亨勒克雷塞尔(CAR-T技术)治疗的患者在基因治疗前的HIV血清学检查为阴性,但在CAR-T治疗后,NAA试验(Roche)的结果表明,HIV核酸为阳性。已使用其他公司的NAA测试和抗原测试来确认未发生HIV感染,并且未检测到具有复制能力的慢病毒,表明先前的NAA测试结果为假阳性。


这些案例报告提醒我们,当使用NAA测试诊断HIV感染时,由于存在假阳性,需要仔细解释测试结果,尤其是对于那些感染风险较低的人群。


误解二:快速的HIV抗体检测可用于HIV感染的早期诊断


经典的HIV血清学测试需要采集血液,并且由于血液样本的处理,无法立即获得测试结果。在某些特殊情况下,例如紧急外科手术或孕妇的紧急分娩过程,有必要立即了解患者的HIV感染状况,并且快速的HIV抗体检测可以满足相应的临床需求。快速的HIV抗体检测通常可以在20-30分钟内完成,因此它也适合在基层医疗诊所进行与HIV相关的检测和咨询。此外,推广HIV抗体自测快速检测试剂盒将有助于提高全世界的HIV检测率。市场上还有一种快速检查方法,该方法仅需要收集口腔分泌物而无需收集血液即可完成测试,这受到患者的欢迎。


但是,快速检测的“快速”仅意味着可以快速获得检测结果,而无助于HIV感染的早期诊断。实际上,与传统和传统医院的血液采样测试相比,大多数快速测试条都不灵敏和特异,很容易导致误诊和漏诊。因此,为了实现对HIV感染的准确和早期诊断,对HIV抗体快速检测呈阳性的个体仍然需要进行抗原抗体组合检测,并经过正式的HIV感染诊断过程以确认他们是否被感染。


误解3:艾滋病毒感染在早期主要依靠CCR5受体,因此不需要进行嗜性测试


HIV的宿主细胞主要是CD4 + T淋巴细胞和单核巨噬细胞。 HIV对靶细胞的入侵必须通过病毒包膜上的Gp120与宿主细胞膜上的CD4表面受体结合。此外,它还需要参与共受体,即趋化因子受体CCR5,CCR3或CXCR4。向性性是指HIV使用不可用的共受体入侵靶细胞的能力。根据共受体的用途,HIV可以分为使用CCR5的R5病毒和使用CXCR4的X4病毒。同时,还使用了两种受体R5 / X4病毒。 R5滋养病毒株出现在感染的早期和无症状阶段,主要感染单核巨噬细胞。随着疾病的进展,X4病毒株逐渐增加,主要感染和破坏CD4 + T淋巴细胞。



通过不同的共受体感染宿主细胞


辅助受体可以用作新抗病毒药物的靶标。 2007年,美国FDA批准了首个CCR5拮抗剂maraviroc,用于治疗感染R5热带病毒株的患者。如果患者需要使用Maravirol,则必须对其进行病毒嗜性测试,因为如果患者的身体主要是X4热带病毒,那么服用Maravirol(一种专门针对CCR5的抗病毒药物)将不会产生任何效果。 。除了在应用Maraviiro之前进行病毒嗜性测试外,在治疗过程中考虑Maraviro的耐药性时还需要进行嗜性测试,因为耐药性突变可以改变病毒的嗜性,如X4。


2018年11月,中国科学家何建奎在第二届国际人类基因编辑峰会上宣布,最近有一对基因编辑的双胞胎女孩在中国出生。何建奎基因编辑了双胞胎女孩的胚胎,并修饰了它们的CCR5基因,以实现对HIV感染的免疫力。但是,何建奎可能还不清楚,HIV也可以通过CXCR4作为共同受体侵入宿主细胞。即使患者感染了R5热带病毒,并非所有病毒都仅使用CCR5共受体入侵靶细胞。因此,何建奎不可能通过修饰胚胎的CCR5基因来达到对HIV感染免疫的目的。


使用技术手段纠正这些错误的神话并保持科学的敬畏精神可以提供准确而有价值的诊断和治疗信息。


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